紫外分光光度計基本工作原理和紅外光譜儀相似,利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質(zhì),引起分子中價電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜,反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內(nèi),對于一個特定的波長,吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此測量光譜可以進行定性分析,而且根據(jù)吸收與已知濃度的標樣的比較,還能進行定量分析。
紫外分光光度計就其基本結(jié)構(gòu)來說,是由五個基本部分組成的,即光源、單色器、吸收池、檢測器及信號指示系統(tǒng)。
1.光源
在紫外可見分光光度計中,常用的光源有兩類:熱輻射光源和氣體放電光源。
熱輻射光源用于可見光區(qū),如鎢燈和鹵鎢燈;氣體放電光源用于紫外光區(qū),如氫燈和氘燈。
2.單色器
單色器的主要組成:入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準直鏡等部分。
單色器質(zhì)量的優(yōu)劣,主要決定于色散元件的質(zhì)量。色散元件常用棱鏡和光柵。
3.吸收池
吸收池又稱比色皿或比色杯,按材料可分為玻璃吸收池和石英吸收池,前者不能用于紫外區(qū)。吸收池的種類很多,其光徑可在0.1~10cm之間,其中以1cm光徑吸收池最為常用。
4、檢測器
檢測器的作用是檢測光信號,并將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枴,F(xiàn)今使用的分光光度計大多采用光電管或光電倍增管作為檢測器。
5、信號顯示系統(tǒng)
常用的信號顯示裝置有直讀檢流計,電位調(diào)節(jié)指零裝置,以及自動記錄和數(shù)字顯示裝置等。